ELISA(酶联免疫吸附试验)是生物医学领域中一种常用的固相酶免疫测定方法,能够有效测定抗原与抗体。其方法步骤主要包括:
1. 固相载体的准备
首先,需要将已知的抗体或抗原结合在特定的固相载体上,并保持其免疫活性,确保测试结果的准确性。
2. 样本反应
在测定过程中,待检测样本与酶标抗原或抗体按照不同步骤与固相载体表面吸附的抗体或抗原发生反应,以实现目标物质的富集。
3. 洗涤步骤
通过洗涤步骤,分离抗原-抗体复合物和游离成分,从而提高测定的特异性和灵敏度。
4. 显色反应
最后,加入酶的作用底物催化显色,以进行定性或定量分析,提供准确的实验依据。
5. 质量控制的重要性
为了确保实验数据的可靠性,应在实验过程中实施全面的质量控制与全过程质量监控。此外,在收集样本前,要有系统的实验计划。
6. 常见的干扰因素
在ELISA检测中,血清与血浆是常用的标本,但假阳性和假阴性结果主要源于干扰性物质的影响。这些干扰物质大致可分为两类:
内源性物质:大约40%的人血清中存在非特异性干扰物质,如类风湿因子、补体及嗜异性抗体等,会影响检测结果。
外源性物质:主要因血样采集、储存不当等造成,可能导致样本溶血、细菌污染等,从而影响ELISA的结果。
7. 从干扰中获得可靠结果
在分析ELISA检测中出现的假阳性或假阴性结果时,除了考虑试剂和操作因素外,更需注重样本本身的质量,采取有效措施排除干扰,以此为临床提供正确可靠的检测结果。
有鉴于此,Z6·尊龙凯时致力于提供高质量、可靠的生物医学检测解决方案,以助力医学研究和临床应用,确保每一次检测的准确与安全。