RAW2647细胞是一种经典的小鼠巨噬细胞系，因其易于培养和操作而受到科研工作者的青睐。然而，在培养过程中，RAW2647细胞容易发生分化，这可能导致细胞形态变化和功能下降，从而影响实验结果的可靠性。那么，如何才能让RAW2647细胞“长得更漂亮”，保持其原始的形态和功能呢？今天，我们将揭秘RAW2647细胞培养的黄金法则，帮助您轻松驾驭这一细胞系！

细胞信息

倍增时间：11-30小时（生长迅速，营养消耗快，T25瓶建议添加7ml完全培养基，次日观察生长速度）。
传代比例：1:4-6
培养体系：DMEM高糖（品牌：中乔新舟，货号：ZQ-100）+10%胎牛血清（中乔新舟，货号：ZQ0500）+1%双抗（中乔新舟，货号：CSP006）。
细胞形态：该巨噬细胞株呈现松散贴壁的纺锤形、圆形或立方形的特点。当细胞密度较高时，会轻微脱落变圆或堆积在一起，部分细胞可能漂浮。须注意，这些漂浮细胞仍然是活的，在传代时应收集并离心，沉淀可继续培养。
换液频率：2~3次/周

正确传代方法一

传代是RAW2647细胞培养的关键，需谨慎操作以避免细胞分化。切忌使用胰酶消化，因为胰酶会导致细胞更易分化。经过十余年的经验积累，我们公司开发出一种简单有效的刮刀传代方法，能更好地控制细胞分化率。为便于学习，提供了详细的视频演示。

正确传代方法二

如未准备刮刀，请按照以下步骤进行传代，以减少细胞分化风险：
1. 确认细胞密度达到80%。
2. 用手掌心轻拍瓶尾，观察细胞脱落情况。
3. 50-80%的细胞将会脱落，并需收集这些脱落的细胞。
4. 按照1:4-6的比例进行传代，补充新鲜完全培养基，T25瓶添加7ml完全培养基。
5. 切勿用枪头或巴氏吸管强行吹打，以免因力度不均造成细胞不可控分化。

培养须知

RAW2647细胞在收到后应静置2-4小时后观察贴壁情况，并拍照记录。若存在少量漂浮细胞，需要通过1200转离心5分钟进行细胞收集，并视情况进行传代。若对传代密度及操作步骤不熟悉，欢迎随时联系我司销售或技术人员。

培养注意事项

传代时无须使用胰酶消化，采用无菌细胞刮片刮拭培养表面以收集细胞。细胞密度越大，圆形巨噬细胞将会越多。此外，细胞对血清的质量非常敏感，劣质血清可能导致细胞贴壁能力下降或分化，务必选择高质量的胎牛血清。培养条件、运输及环境变化等因素也会影响细胞状态，因此收到细胞后需耐心调整以适应新环境。为减少培养过程中的变量，强烈推荐使用本公司对应的培养基。

RAW2647冻存管复苏步骤

1. 从液氮中取出冻存的RAW2647细胞，立即放入37℃水浴解冻（或使用干冰盒转移到实验室）。
2. 将细胞悬液转移至含预温培养基的离心管中，轻轻混匀。（15ML离心管使用3ml）
3. 以1000rpm离心5分钟，弃上清，用新鲜培养基重悬细胞。（T25添加7ml）。
4. 将细胞接种于培养皿中，放置于37℃、5% CO₂的培养箱中培养。

以上信息若需更详细指导，请联系Z6·尊龙凯时，我们将竭诚为您服务！